ПОДГОТОВКА, ПОДКЛЮЧЕНИЕ И ИЗОЛИРОВАННАЯ ПЕРФУЗИЯ ДОНОРСКОГО МАТЕРИАЛА

Подготовка аппарата для перфузии донорского материала и исполнения процедуры экстракорпоральной перфузии. Аппарат для исполнения процедуры экстракорпоральной перфузии собирают в стерильной операционной, где будет производиться процедура или стерильном боксе, находящимся в непосредственной близости от операционной. Сборку перфузионной системы, её заполнение и оксигенацию наполняющего раствора осуществляют в полном соответствии руководящей инструкции фирмы-производителя.

Подготовка донорского материала к перфузии осуществляют в стерильных условиях операционной или стерильного бокса, расположенного в непосредственной близости от операционной. Загрузку рабочей камеры-гемофильтра осуществляют только после готовности перфузионного устройства и перфузионной системы к работе.

Подготовка донорского материала к перфузии после гипотермического хранения  (+5ºС). Донорский материал, прошедший вторичную обработку после его доставки к месту исполнения процедуры в специальной подготовке к перфузии не нуждается и может быть загружен в перфузионную камеру гемофильтра. Для этого останавливают роликовый насос, отсоединяют от камеры приносящую перфузат магистраль. Гемофильтр располагают в горизонтальном положении входным отверстием вверх и с помощью стерильного пинцета производят загрузку донорского материала так, чтобы он находился по ходу движения перфузата и крови между входным отверстием приносящей магистрали и фильтром. Количество донорского материала, загружаемого в рабочую камеру 4-8 гр. (1-2 контейнера ёмкостью 5,0 мл каждый). После этого рабочую камеру гемофильтра герметично закрывают, соединяя приносящую магистраль с входным отверстием, через которое осуществляли загрузку. Т.о. перфузионная система готова к работе в замкнутом режиме циркуляции. Включают роликовый насос, устанавливая объёмную скорость перфузии 20-40 мл/мин. Удаляют воздух из гемофильтра, попавший туда во время загрузки рабочей камеры. В таком режиме перфузионная система должна работать до начала процедуры, т.е. до подключения её магистралей к сосудам пациента или до момента забора перфузата (объёмная скорость перфузии = 40 мл/мин; рО₂ = 240-300 мм рт.ст.).

Подготовка донорского материала к перфузии после криоконсервации (–50ºС) производится в стерильных условиях за 30 минут до момента исполнения процедуры. Всю подготовительную работу с криоконсервированным материалом и загрузку рабочей камеры-гемофильтра осуществляют только после окончания сборки перфузионного устройства и перфузионной системы.

Контейнер с замороженной тканью извлекают из морозильной камеры и помещают в водяную баню с температурой воды +35+40ºС на 2-3 минуты при постоянном перемешивании. За это время происходит полный отогрев донорского материала до температуры +4ºС.

Донорский материал извлекают из контейнера и переносят в стерильную колбу (250 мл) с охлаждённым до +4ºС раствором для отмывания от криопротекторов, представляющим собой раствор Евроколлинз с добавлением 0,5 М сахарозы и 5% диметилсульфоксида. После тщательного перемешивания колбу с тканью помещают в холодильник на 20 минут и выдерживают при температуре +4ºС. По истечении этого срока в колбу добавляют равный объём охлаждённого до +4ºС стандартного раствора Евроколлинз, уменьшая таким образом концентрацию криопротекторов вдвое. Такое разведение повторяют ещё дважды, после чего ткань переносят в охлаждённый до +4ºС физиологический раствор и она готова для загрузки в рабочую камеру гемофильтра.

Загрузку камеры гемофильтра производят так, как было описано выше. Для этого останавливают роликовый насос, отсоединяют от камеры приносящую перфузат магистраль. Гемофильтр располагают в горизонтальном положении входным отверстием вверх и с помощью стерильного пинцета производят загрузку донорского материала так, чтобы он находился по ходу движения перфузата и крови между входным отверстием приносящей магистрали и собственно фильтром. Количество донорского материала, загружаемого в рабочую камеру 4-8 г (1-2 контейнера ёмкостью 5,0 мл каждый). После этого рабочую камеру гемофильтра герметично закрывают, соединяя приносящую магистраль с входным отверстием. Т.о. перфузионная система готова к работе в замкнутом режиме циркуляции. Включают роликовый насос, устанавливая объёмную скорость перфузии 20-40 мл/мин и удаляют воздух из гемофильтра, попавший туда во время загрузки рабочей камеры [1]. В таком режиме перфузионная система должна работать до момента начала запланированной процедуры или до забора перфузата.

назад >>>